柱层层析硅胶的原理和用途，你都了解过吗？

今天，主要了解柱层层析硅胶的原理和用途

柱层析硅胶的原理：

（1）柱层析硅胶的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附能力的不同而得到分离，通常情况下极性较大的物质会更容易被硅胶吸附，极性较小的物质并不容易被硅胶吸附，在整个层析过程中，是一个通过吸附、解吸、再吸附、再解吸的过程。

（2）柱层析硅胶流动相：极性较小的用乙酸乙酯，石油醚系统；极性较大的用甲醇、氯仿系统；极性大的用甲醇、水、正丁醇、醋酸系统、拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸。

二. 柱层析硅胶的使用方法：

1.称量：200-300目硅胶，称30-70倍于上样量，如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，同时用烧杯量100ml也可以。

2.搅成匀浆：加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌，如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯丙酮体系，就用石油醚拌，如果洗脱剂是氯仿醇体系，就用氯仿拌，如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。

3.装柱：将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3 体积石油醚(氯仿)，装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内，随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚(氯仿)将其冲入柱中。

4. 压实：沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定，柱床约被压缩至9/10体积，无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

5.上样：干法湿法，海沙是没必要的。上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面，然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。压实：沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定，柱床约被压缩至9/10体积，无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

6.过柱和收集：柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡，太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。收集的例子：10mg.上样量，1g硅胶H,0.5ml收—馏分，1-2g上样量，50g硅胶(200-300目),20-50ml收—馏分。

7.检测：更多地使用专用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度-般比喷显剂底1-2个数量级。

8.送谱：收集的产品旋干，在送谱前通常需要重结晶。如果样品太少或为液体，可过一-小凝胶柱，作为送谱前的最后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶"峰。

三. 柱层析硅胶的应用领域：

柱层析硅胶又称为层析介质，他的具体产品是以优质硅胶为原料，现在经东营一鸣新材料有限公司的精细加工处理制备成具有一定粒度分布范围、高纯度白色粉末。在当下已经广泛用于医药、化工、植提、生化等行业。目前柱层层析硅胶主要用于石油产品精制，脱除芳烃物质或用于中草药有效成分的分离提纯，纯度物质的制备柱层层析硅胶为-多孔性物质，分子中具有硅氧烷的交链结构，同时在颗粒表面又有很多硅醇基，对不同物质组份吸附保留时间不同，达到分离提纯的目的。